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疑似人禽流感及不明原因肺炎病例标本核酸检测的注意事件

信息来源: 中国betway体育平台 浏览次数:671 日期:2009-01-29
一、标本的采集 尽量采集下呼吸道标本,如下呼吸道汲取物和肺穿刺标本等。采集标本的溶液使用新开封的DMEM或者Hanks(PH7.0,过酸或过碱都会导致病毒的灭活,不利于病毒分离)液,标本采集之后要密封好。送往国家流感中心实行复核的病例标本采集之后直接送检,如要分装,在洁净的BSL-2 生物安全柜内操纵。 二、核酸的提取 疑似禽流感/不明原因肺炎核酸检测各个实验区域应尽量分开,如反应液配制区域、核酸提取区域和检测区域最好分别位于独立的房间内。如果不能做到各个实验区域分开,实验操纵开始前应做到清理净化工作:实验区域的台面先用清水擦拭一遍,再用蒸馏水擦拭一遍,最后用75%的医用酒精擦拭一遍。核酸提取的生物安全柜台面擦拭过后,紫外消毒20~30分钟,然后开启超净台的通风装置,净化至少10分钟。 核酸提取和配制反应液使用的移液器应分开使用,并且做到专用,如不能分开使用,则实验操纵前用含有DNase和RNase的溶液擦拭,或者清水多次擦拭,去除核酸污染。核酸提取时,离心机、振荡器等实验仪器应位于同一区域内,幸免来回走动产生气溶胶。核酸提取过程中同时提取一个阴性对照作为参考。使用过的废弃Tip头应及时放入自封袋内,实验结束后实行高压灭菌。 三、核酸检测反应体系的加样 核酸检测反应体系配制完成后,先向反应液中加阴性对照,待所有阴性对照加样完成后再加待检测标本的核酸,最后加阳性对照。使用过的废弃Tip头应及时放入自封袋内, 实验结束后实行高压灭菌。 四、PCR产物电泳 由于电泳过程是最容易造成气溶胶污染的环节之一,电泳区域一定要同其它区域在物理上分开.,及时清理实验废弃物,净化实验工作台面。 五、生物安全 无论是标本采集过程中还是实验检测过程中,所有工作人员要做到个人防备,佩戴N95口罩、帽子和无粉乳胶手套,穿防备服,幸免实验室感染的产生。
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